低温电子显微镜芯

CryoEM Image
苏哈chakrapani
导向器

苏哈chakrapani
sxc584@case.edu

标准EM服务经理

藤冈久
hxf3@case.edu

设施经理

李鲲鹏
kxl662@case.edu

管理员

马特·德弗里斯
216.368.1266
mpd35@case.edu

在电子显微镜核心设施提供了关键的超微结构的技能,包括免疫细胞化学,除了常规的EM技术。该方法可以根据具体的需求。该设施包括一个T12显微镜,设备齐全的样品处理室,一个切片室和黑暗的房间。该设施提供完整的透射电子显微镜的服务,包括样品处理,超薄切片,胶片显影,和照相印刷,以及免疫细胞化学。校内的合作是可用的。我们欢迎训练有素的EM用户以及谁希望接受培训的研究人员。滚动阅读更多永利棋牌游戏参与的方法。
 

访问他们的iLab站点查看并请求服务

 

位置

ccmsb,房间111克

 

可用的技术

电子显微镜

在透射电子显微镜(TEM),高能量电子束被用于检查分子的结构,下到的原子细节水平。电子束通过非常薄的试样项目样品的二维图像传递到检测器(一个电荷耦合器件; CCD或直接电子检测器; DED)。计算算法用于对准二维图像投影,以产生又被用于原子模型构建三维重建。

 
低温电子显微镜(冷冻电镜)是一种方法,使水合生物标本在他们自然环境在TEM低温下观察。冷冻电镜广泛地包括三种不同的方法:电子晶体学,单粒子冷冻电镜和电子cryotomography。在最近的技术进步冷冻电镜结构生物学使复杂的生物分子的独特的景观的新时代已经迎来。生物分子的原子细节可以让我们更好地了解支配生活并帮助药物设计和开发的生理现象。


CWRU cryo-EM facility houses state-of-the-art electron microscopes in a newly renovated space (Titan Krios G3i+GIF+K3 camera, FEI Tecnai F20+Tvips F416&DE20 camera, FEI Tecnai T12+Gatan895 camera). The facility is set up to be used with flash-frozen (single particle, cryo-ET and crystallography) samples. The Facility also offers complete conventional TEM services including sample processing, ultramicrotomy, film developing, and photographic printing, as well as immunocytochemistry. Intramural collaboration is available. We welcome trained EM users as well as researchers who wish to be trained.


单粒子冷冻电镜

单粒子冷冻电镜可以提供大量的各种生物分子的结构信息,而无需产生晶体。从40 kDa至大小为几个MDA的蛋白质可以通过这种方法进行研究。很少的样品需要这种技术。为冷冻电镜样品,典型地为纯化的蛋白质样品,被嵌入在冷冻电镜网格玻璃体冰,并且被保持在低温下的同时图像通过电子显微镜记录。在完成成像之后,使用单粒子重建方法来解决该蛋白质的结构。为单个粒子当前分辨率冷冻电镜是在1.65〜3.5的范围内。 

低温电子断层扫描 

低温电子断层扫描(低温等)可揭开细胞和亚细胞大分子的对象的详细的三维结构。对细胞和组织的高压冷冻技术可以在天然状态提供的100μm的大样本良好保存。单个细胞可以通过让他们与液体乙烷被玻璃化。这允许在他们的蜂窝环境中,这提供了深入了解细胞过程在分子水平研究大分子复合物。以不同的角度收集的样品的2D图像(突起)允许所述三维结构,以通过反投影方法来重建。用于低温电子断层扫描分辨率是在4-30的范围内。 

电子晶体

电子晶体正在进入通过其能力的结构生物学家和化学家的范围在确定小晶体,命名为它开发由塔米尔戈南的研究小组在2013年microed技术方法涉及在低温条件下的微小蛋白质晶体拍摄电子的结构收集所得到的电子衍射图案。电子与物质发生相互作用比更强烈的X射线,这就是为什么它可以从非常微小的晶体获得有用的数据。对于microed分辨率在0.6〜2.0的范围内。